CCK-8增强溶液5ml 稳定实验专用基本介绍 
 

  Cell Counting Kit-8（简称CCK-8），是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。 CCK-8试剂中含有WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-   基)-3-(4-   基)-5-(2,4-二磺酸 )-2H-四唑单钠盐）是一种类似于MTT的化合物，它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓     （1-Methoxy PMS）存在条件下，可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan （参考图1），生成的Formazan数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析，细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。 
 
 
 CCK-8增强溶液5ml 稳定实验专用性能特点 
 

    
 
 
 CCK-8增强溶液5ml 稳定实验专用技术参数 
 

    
 
 
 CCK-8增强溶液5ml 稳定实验专用使用说明 
 

    
 
 
 CCK-8增强溶液5ml 稳定实验专用采购须知 
 

  1. 建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。-8 反应时间的确定：一般情况下，白细胞显色比较困难，因此需要增加细胞数量和延长 CCK-8 反应时间。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色，因此悬浮细胞在加入CCK- 8 培养 0.5-4 小时后，可先从培养箱取出，目测或用酶标仪测定显色程度，若显色困难可以继续培养数小时后再确定。对于贴壁细胞，CCK-8 的培养时间一般为0.5-4 小时，在培养 20 分钟左右即可取出肉眼观察显色程度。3. 每孔接种细胞数：当使用标准 96 孔板时，贴壁细胞的  接种量至少为1000 个/孔(100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此  接种量不低于2500 个/孔(100 μl 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10%加入 CCK-8 溶液。4. 设定空白对照：在不含细胞的培养基中加入 CCK-8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验（细胞毒性实验）时，还应考虑药物的吸收，可在加入药物的培养基中加入 CCK-8，培养一定的时间，测定 450 nm 的吸光度作为空白对照。5. 影响 CCK-8 测定的物质： 由于 CCK-8 检测细胞活性的原理是通过检测活细胞脱氢酶催化的反应，所以如果待测体系中存在氧化还原物质则可能会干扰检测结果，还原性物质会使吸光度增加，氧化性物质会使吸光度减小，因此应需设法去除这些物质的影响。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响，培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除只含有培养基的对照孔中本底吸光度而消除，因此不会对检测结果造成影响。上海富衡生物科技有限公司 网址：联系地址：上海闵行区新骏环路 188 号6. 测定波长：如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议采用双波长进行测定，检测波长450nm，参比波长 600-650nm。如果没有 450nm 的滤光片，可以使用吸光度在430- 490nm 之间的滤光片，但是 450nm 检测灵敏度  。7. 当在培养箱内培养时，培养板 外一圈的孔容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误差。一般情况下， 外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。8. 如果细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化，应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。9. 为了您的健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。